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摘要:目的 分析和探讨液基薄层细胞制片技术在胸腹水标本中的有效运用。方法 收集我院病理科2010年10月~2014年5月的胸腹水标本380例,然后分别采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查,最后对检查的结果进行对比和分析。结果 传统涂片技术的肿瘤细胞检出率为11.32%;液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率为22.63%,而且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率比较高,可以进行临床推广应用。
关键词:液基薄层细胞制片技术;胸腹水标本;运用 胸腹水脱落细胞学检查由于对患者损伤较小,操作方法简单,检查周期较短,已成为诊断肿瘤的重要方法[1]。由于多种因素的影响,传统的涂片技术的肿瘤细胞检出率并不是很高,因此使很多疾病不能得到及时有效的治疗。随着细胞学技术的不断进步,液基薄层细胞制片技术作为一种新的细胞学检查方式克服了传统涂片技术的缺点,逐渐成为细胞学病理技术的研究热点。本次研究选择我院2010年10月~2014年5月的胸腹水标本380例,然后分别采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查,并对最终的结果进行回顾性比较分析,现总结报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料 选择我院2010年10月~2014年5月的胸腹水标本380例,其中胸水275例,腹水105例,分别采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查。其中,男210例,女170例,年龄为22~89岁。
1.2方法
1.2.1传统涂片技术 取新鲜胸腹水置于2个10 mL 离心管内,每管8 mL,2000 r/min,离心10~15 min,弃上清液,然后把沉淀物仔细涂抹在涂片上(血性标本取红细胞沉淀与上清液之间的细胞层),通常涂片的数量以3张为宜,接下来使用浓度为95%的乙醇对涂片进行固定,大约10 min以后再进行巴氏染色,中性树胶对涂片进行封固,最后将处理好的涂片送至显微镜下进行观察。
1.2.2液基薄层细胞制片技术 取新鲜胸腹水置于2个10 mL 离心管内,每管8 mL,2000 r/min,离心10~15 min,弃去上清液,保留管底有用细胞,再加入大约细胞团体积3倍的细胞基液。在漩涡混匀器上混匀10 s后,用移液器吸取15 ml在脱脂载玻片上涂片,涂片面积直径为1.5 cm。涂片干燥后用95% 乙醇固定30 min,巴氏染色,中性树胶封固,最后将处理好的涂片送至显微镜下进行观察。
1.3诊断方法 采取传统涂片技术和液基薄层细胞制片技术对胸腹水标本进行细胞学检查以后,由同一组细胞学专家来进行阅片,对涂片的细胞进行相应的分级和分型。本次实验研究采用3级诊断法,将实验的结果分为阳性、阴性和可疑。检出率=阳性的例数/总例数×100%。
1.4统计学分析 采用SPSS 13.0统计学软件,计数资料采用χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05)。
2结果
传统涂片技术的肿瘤细胞检出率为11.32%;液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率为22.63%,因此液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率比传统涂片技术的肿瘤细胞检出率高,且差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。
3讨论
液基薄层细胞制片技术通过薄层细胞处理来对细胞进行保存,这种技术的操作过程比较简单,同时它在细胞标本的采集和制片方面也比传统涂片技术有了明显的进步[2]。某肿瘤患者的细胞传统涂片和液基薄层细胞制片,见图1、图2。一般情况下,外伤和肿瘤等都会引起胸腹腔出现积液,而胸腹水是很好的培养基,即使将胸腹水抽出体外以后,仍然能够在较长的时间内保持细胞的原有形态。为了保持细胞的原有形态,胸腹水应当及时送检并进行制片,假如胸腹水不能及时送检和制片,可以采用低温保持和加入适量酒精的方法来保持细胞的原有形态,使胸腹水细胞的质量能够满足诊断的要求。巴氏染色是一种符合细胞学质控要求的染色方法,它最大的优点是能够对细胞核的结构进行精确清晰的显示[3]。
图1 某肿瘤患者的细胞传统涂片 图2 某肿瘤患者的液基薄层细胞制片
肺癌、乳腺癌、淋巴瘤和胃肠道肿瘤等是胸腹水中最为常见的几种转移癌类型[4]。在进行胸腹水细胞的制片过程中,深红色和暗红色的样本对制片的最终效果有更加明显的影响,且此类样本用于制片中的量以16~30 ml为宜[5]。一般情况下,中间层为肿瘤细胞的聚集区域[6]。所以胸腹水细胞的制片过程的最关键的步骤在于中间层细胞的提取,此时必须把握好离心力,高速离心能够使样本中的细胞达到良好的分层效果。在实际的操作过程中,胸腹水液基细胞学诊断有三个要素,①在形态学上尽量对良恶性进行区分,②与病史密切结合,③利用IHC对细胞块进行辅助诊断。大量的研究应用证实,液基薄层细胞制片技术可以有效避免涂片的厚薄不均现象,并且能够及时清除杂质的干扰,提高涂片的质量,保证了样本细胞的完整性,液基薄层细胞制片技术增强了诊断时细胞结构的辨识度。因此,液基薄层细胞制片技术可以大大提高肿瘤的确诊率,使遗漏率降低。
本次实验研究的结果表明,传统涂片技术的肿瘤细胞检出率为11.32%;液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率为22.63%,因此液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率比传统涂片技术的肿瘤细胞检出率高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。
综上所述,液基薄层细胞制片技术肿瘤细胞检出率比较高,可以进行临床推广应用。
参考文献:
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[2]李峥嵘,李沛隆.液基薄层细胞制片技术在胸腹水标本中的应用价值[J].河南医学研究,2014,03(3):85-87.
[3]孙雁,金寿同,陈淑云.膜式液基薄层细胞制作技术[J].工企医刊,2012,04(5):54.
[4]王守梅,杨秋红,魏静静,等.比较胸腹水液基细胞学剩余标本制作细胞块的3种方法[J].第二军医大学学报,2013,02(4):160-163.
[5]马博文,杨凡.液基薄层细胞制片技术在非妇科标本中的应用[J].诊断病理学杂志,2010,01(3):63-66.
[6]江涛,马世婧,张程,等.一种适用于胸腹水细胞诊断的液基薄层制片技术[J].临床与实验病理学杂志,2012,11(2):1292-1293.
编辑/张燕