【摘要】 新鲜标本印片细胞学检查能为冰冻切片提供许多信息,细胞印片是一种较好的快速定性诊断方法。在乳腺、甲状腺、妇科肿瘤等手术快速病理诊断中,快速印片细胞学检查与冷冻切片结合运用,可在一定程度上防止误诊或漏诊,提高冷冻切片诊断的准确性。诊断细胞学是一种快速、简单、经济的诊断技术,有经验的医师做细胞学诊断时可为临床提供可靠的依据,在某些情况下恶性肿瘤的阳性细胞学诊断具有与手术活检同样的重要性。由于组织冷冻后会引起细胞形态改变,冷冻切片中出现许多人为的假象,但印片的细胞学检查由于固定及时,没有冷冻所引起的形态改变,取材容易,方法简便,获得的细胞成分较多,并能够保持细胞形态特征及部分组织结构,与冷冻切片联合诊断,可以互相取长补短,提高诊断准确率。
1 材料
2005年1月至2009年3月,一汽总医院病理科共进行术中快速冷冻切片检查1400例,范围涉及甲状腺、乳腺、妇产科肿瘤、肝脏、胆囊、肾脏等病变,全部标本在冷冻取材时均进行标本快速印片细胞学检查与冷冻切片联合诊断。
2 制片及染色
2.1 印片制作 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键,故要准确的选择部位,在病变区直接采集细胞。病理医师在进行冷冻标本大体检查和取材时,选取典型病变,将清洁玻片与标本剖面平行,垂直适当用力轻压,不要平行拖拉,一般印片2张。
2.2 印片固定及染色 将印片在空气中放置片刻,待组织周边稍干而中央未干时浸入固定液,固定液用95%乙醇溶液,固定时间30 s。常用的染色方法是苏木素、伊红染色:方法是把固定好的玻片经水洗后,浸入苏木素液中1 min,自来水洗20 s,0.5%盐酸乙醇分化,1%氨水溶液蓝化10 s,0.25%伊红染数s,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。全部制片时间在6 min 以内完成。
2.3 印片要点 实性包块印片应选取病变典型、质嫩及脆弱部位印片,病变区较小可适当多做几张印片,以防止细胞过少或出现假阴性结果;囊性包块印片时应先将囊液放掉,选取囊壁较厚、病变典型、或有乳头的位置,如标本有囊液或出血,可先用干纱布将液体擦干,然后再作剖面印片,尽可能避开出血、坏死及脂肪组织较多的区域,并防止水分等混入标本。操作要轻巧,用力要适当,避免挤压以防损伤细胞;印片要均匀,厚薄适度,太厚细胞堆叠,太少细胞过少,均影响诊断。
2.4 及时正确地固定 固定的目的是保持细胞自然形态、防止细胞自溶。印片切勿高温烘烤、干燥过度,以防细胞变形、核染结构不清,造成人为细胞退变,影响诊断。固定液的选择很重要,经反复试验比较证明95%乙醇较好的固定效果,乙醇固定液渗透性较强,固定效果较好;印片固定时间不可过长或过短,时间过长容易导致细胞核过度收缩,核染变深,核内染色质浓缩不清晰;时间太短容易使细胞肿胀变大,影响诊断。
2.5 提高染色质量 印片染色质量的好坏在很大程度上直接影响细胞学诊断的准确性。术中快速病理诊断需要在很短的时间内对组织的病变做出诊断,在节约时间的同时不能忽略了印片制作的质量。细胞印片快速病理诊断结果准确与否与肿瘤组织类型和肿瘤细胞的多少、取材部位、制片染色质量、诊断者的经验等因素密切相关。
3 结论
总之,术中细胞印片检查不需特殊设备,操作简便,有较高的实用价值,可部分代替冷冻切片诊断,发挥重要的社会效益,广泛应用本法应得到充分的肯定。细胞印片快速病理诊断结果准确与否与肿瘤组织类型和肿瘤细胞的多少、取材部位、制片染色质量、诊断者的经验等因素密切相关。从事术中细胞印片病理诊断医师必须要具有丰富的阅片经验,为提高准确率,应加强病理与临床医师的联系,建立病理医师术中病理诊断查房制度,必要时可直接参观手术。细胞印片病理学是一个初筛检查,不能代替病理组织学诊断,在快速病理诊断过程中一定要保持清醒的头脑,没有推不翻的恶性证据,决不能报恶性,宁可等待石蜡切片结果,以免给患者造成不必要的损失和引起医疗纠纷。在这两年的实践中,本院病理科逐渐总结了丰富的经验,相信随着这项技术的逐步成熟,能更好地为患者服务。