先进入减数分裂间期,此时细胞形态多为近似圆形。进入减Ⅰ前期:细胞核开始消失,染色质加深浓缩形成染色体,此时可以较为清楚地看到联会的同源染色体(图3A)。减Ⅰ中期:细胞核膜与核仁消失,纺锤体出现,染色体集中出现在细胞质中间的赤道板上,此时染色体排布有重叠现象不利于染色体的观察(图3B)。减Ⅰ后期:核内同源染色体由纺锤丝牵引,各自移向两极,此时可以观察到核内两侧有染色体的聚集(图3C)。减Ⅰ末期:染色体解压缩,染色质逐渐向中间聚集,细胞质分裂1次,形成2个大小均等的细胞质(图3D)。二分体时期:减数第一次分裂后,核内染色质不进行复制,经短暂的间期后,分裂在2个子细胞的染色质再次浓缩形成染色体(图3E)。减Ⅱ中期:各姐妹染色单体向细胞中部聚集,排布于赤道板上(图3F)。减Ⅱ后期:姐妹染色单体由纺锤体牵引向两侧聚集(图3G)。四分体时期:两侧聚集的染色体再次解浓缩,核膜核仁出现,细胞质进行第二次分裂,小孢子细胞质外形成胼胝质共同包围形成四分体,至此减数分裂完成(图3H)。
此后小孢子进一步发育直至形成具有细胞外壁的单核花粉粒。游离状态下的单核花粉粒,形状近似椭圆,细胞核大且集中,胞质浓厚,未观察到明显的液泡。
3 讨 论
甘蓝型油菜,尤其是在自然界稳定遗传的甘蓝型油菜[11]。在新合成的双二倍体中,稳定的染色体配对通常是由遗传控制(例如小麦、燕麦)的,或者是由染色体结构改变而获得的(如棉花)[12-15]。尽管碱性品红染色液染色效果出众,但是对染色体与细胞质的区分效果较差。而改良后的卡宝品红染色液能有效地解决这一问题,使染色体着色明显强于细胞质,在观察时很容易将两者区分开来。
表观遗传学(epigenetics)是不同于传统遗传学的一个学科分支,其研究的主要内容是由非基因序列改变而引起的,在发育和细胞增殖过程中可以稳定传递的基因或者蛋白表达的变化[16-17]。染色体上组蛋白发生的共价化学修饰(甲基化,乙酰化等)也属于表观遗传学的范畴[18]。因此,观察花粉母细胞的减数分裂行为,有助于开展甘蓝型油菜的表观遗传学研究。试验结果显示,在减数分裂Ⅰ和Ⅱ的前期、中期和后期可以很好地观察到染色体的分布情况,为研究甘蓝型油菜染色体上组蛋白甲基化修饰的变化情况打下了基础。
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